显影剂说明.doc

要紧提示:
SuperSignal West 薄弱地出类拔萃的化学作用出类拔萃基质是一种Gao Min敏感问题。,它比聚集化学作用出类拔萃产额(包含ECL)都要多。,Lumino)应该敏感,超敏捷衬底的最适宜的功能,对称体应该比安宁浸泡更薄。。条件您早已运用在上的的基板或安宁次要化学作用出类拔萃SU,这么,运用该化学作用出类拔萃底物缩减最好者对称体和T。。譬如,条件您运用ECLreceive 接收,以1:100缩减一抗力。这么,你运用特大号商品以信号告知韦斯特 比科解的时期,用1:500缩减。。提议运用表1缩减地域。。
表1。 用SuperSignalWest PICO化学作用出类拔萃底物的对称体缩减。
一抗:1:1000-1:5000或许
二抗:1:20000-1:100000或许10-50ng/Ml
阐明
Thermo Scientific SuperSignal West Pico化学作用出类拔萃底物是检测辣根超氧化物酶跺脚的对称体的一种绝顶情感变坚挺的浸泡。该浸泡可检测皮肤微观图的总反日。。以信号告知的敏捷性、人力、持续时期容许运用拍照或安宁成像方式来检测HO。。免除印迹可以反复展出,以开腰槽最好的归结为。,或重行冲洗薄层,可供选择的事物对称体的涂,可供选择的事物蛋白质的检测。
要紧产额传达
为了最好的归结为,西部最佳化 Blot的杂多的的部件都是本质的的,包含范本全体数量、一、二抗力浓度、膜选择、封锁液。由于receive 接收不常见的敏感,因而SuperSignalWest 微弱的receive 接收比安宁行情紧握的气体更具机动性。,呼唤较劣的的战利品量、一反二反,通常缩减10-20倍。热同时涂 Scientific SuperSignal Western 印迹变坚挺剂可变坚挺浸泡的敏捷度,树立缩减,对称体种特性变坚挺。
对称体浓度比预浓缩物缩减得多。,为了选择最侵吞的浓度,色斑横跨技术的涂。
无关店receive 接收是杂多的的零碎的最适宜的选择。,因而正西 在遭受剥夺财产权的处罚的健康状况下,试验检测是选择侵吞海豹液的呼唤踏。选择侵吞的海豹液小费协同器官的运用。,阻碍对称体与阻滞药的非种特性穿插反作用力。除此之外,当膜从一种浸泡转变到可供选择的事物浸泡中时,由于无选择侵吞的海豹浸泡。,它创造以信号告知的使终止和树立的变坚挺。。
当涂抗生素的-辅酶R零碎时,避开运用乳制品商店作为封锁气体,由于乳制品商店中牵制大方的的内源性辅酶R。。
运用全面积洗濯缓冲溶液、封锁液、对称体浸泡、基片液体的涂层,确保胶片不干枯。。大方的的闭塞气体和缓冲区可以缩减非种特性以信号告知。。
为了最好的归结为,对称体孵育时可运用摇床。。
预备缩减杂多的的对称体以缩减非种特性以信号告知,在密闭气体中厕吐温-20(终极浓度)。只运用高大量的产额,譬如,热 Scientific Surfact-Amps20(产额号28320),它是得第二名在安培瓶打中提纯洗濯剂。,并确保在小量的超氧化物和安宁致污物。。
不要运用叠渗氮钠作为缓冲浸泡的诚实无欺的。,叠渗氮钠是辣根超氧化物酶的使迟滞的。,背景幕布零碎。
不要用手径直润色薄层。。戴手套或洁净送钻头工。
杂多的的准备应该干净。,无异物。无可见灰的金属(剪子等),灰会创造黑斑或高树立。。
基材液体的在室温下可波动24h。,表露于阳光或安宁强光会损坏任务液体。。为了最好的归结为,液体的得第二名在琥珀瓶中,避开强光。。短时期表露于试验室光无力的损坏任务液体。。
人们开价用于蛋白质转变的杂多的膜。、封锁液、一抗、酶跺脚的两种抗性、缓冲溶液、洗濯剂。对人们的产额或订购传达感兴趣。,您可以爆发人们的网页。
顺序综述:
在意:反日对称体浓度的最佳化,运用准备的对称体缩减比,雄性的归结为可以是C。,提议的对称体级别可以附加。 Materials 本质的零件。
将1mg/ml的一体抗力缩减到μg/ml。 或许 1:1000-1:5000缩减;
将1mg/ml的两种抗力缩减至10-50ng/ml或1:20,000-1:100,000缩减;
将两种根底身分(即显影剂的A液与B液)由于1:1的级别配成液体的;
在意:表露于阳光或安宁强光的任务液感受受到损坏。,故此,液体的应得第二名在琥珀瓶中,避开聚丙烯纤维。,试验室规范灯短期得第二名无力的损坏任务。
将印迹膜相信超以信号告知中 West 基层液体的培育5分钟;
不呼唤的试剂片,用洁净的塑料膜覆盖物标志膜;
X光下展出
安宁呼唤的推论的:
完整正西 印迹膜:蛋白质电泳疗法使分开方式的考虑,并将蛋白质转变到硝化纤维素滤器上。。也可涂安宁典型的膜。;只,最优膜基础的。
缩减缓冲溶液:运用TBS(第28376号产额)或PBS(第28374号产额)。21选一,缩减SuperSignal Western 印迹增强

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