显影剂说明.doc

要紧提示:
SuperSignal West 薄弱地把光射后的神秘的变化把光射后基质是一种Gao Min敏感质地。,它比团神秘的变化把光射后乘积(包含ECL)都要多。,Lumino)只好敏感,超敏捷衬底的最佳效果功能,对称体只好比对立的事物烫伤更薄。。设想您早已运用关于的基板或对立的事物首要神秘的变化把光射后SU,这么,运用该神秘的变化把光射后底物变稀薄最好者对称体和T。。比如,设想您运用ECLreceive 接收,以1:100变稀薄一抗力。这么,你运用过分地打旗语韦斯特 比科解的时期,用1:500变稀薄。。提议运用表1变稀薄见识。。
表1。 用SuperSignalWest PICO神秘的变化把光射后底物的对称体变稀薄。
一抗:1:1000-1:5000或许
二抗:1:20000-1:100000或许10-50ng/Ml
阐明
Thermo Scientific SuperSignal West Pico神秘的变化把光射后底物是检测辣根过氧化氢酶奖章的对称体的一种海拔情感变高的烫伤。该烫伤可检测皮肤microgram 微克的总反日。。打旗语的敏捷性、人力、持续时期容许运用幼苗或对立的事物成像办法来检测HO。。不受影响的印迹可以反复公开,以实现最好的总算。,或重行冲洗影片,另类的对称体的勤勉,另类的蛋白质的检测。
要紧乘积数据
为了最好的总算,西部优选法 Blot的个人财产装配都是绝对必然的的的,包含范本盘存、一、二抗力浓度、膜选择、封液。因receive 接收很敏感,因而SuperSignalWest 无勇气的receive 接收比对立的事物百货商店采购的气体更具流动的。,必然的较次的的战利品量、一反二反,通常缩减10-20倍。热同时勤勉 Scientific SuperSignal Western 印迹变高剂可变高烫伤的敏捷度,背景幕布缩减,对称体特征变高。
对称体浓度比预浓缩物变稀薄得多。,为了选择最右方的的浓度,瑕疵划掉技术的勤勉。
缺少紧密的receive 接收是个人财产体系的最佳效果选择。,因而东方 在损害的保持健康下,试验检测是选择右方的封上液的必然的工序。选择右方的的封上液以某人为受款人协合剂的运用。,屯积对称体与镇压者的发作征穿插反馈噪音。与此同时,当膜从一种烫伤转变到另类的烫伤中时,因缺少选择右方的的封上烫伤。,它原因打旗语的散去和背景幕布的变高。。
当勤勉抗菌作用的-维生素体系时,忍住运用母乳作为封气体,因母乳中有产者小量的内源性维生素。。
运用全大量洗濯缓冲溶液、封液、对称体烫伤、基片液体涂层,确保胶片不干枯。。小量的闭塞气体和缓冲液可以缩减发作征打旗语。。
为了最好的总算,对称体孵育时可运用摇床。。
预备变稀薄个人财产对称体以缩减发作征打旗语,在密闭气体中附属企业吐温-20(终极浓度)。只运用高品质的乘积,比如,热 Scientific Surfact-Amps20(乘积号28320),它是产卵在安培瓶中间的提纯洗濯剂。,并确保在小量的过氧化氢和对立的事物污染。。
不要运用叠充氮钠作为缓冲烫伤的防腐的。,叠充氮钠是辣根过氧化氢酶的延缓的。,妨碍体系。
不要用手率直的接头影片。。戴手套或彻底小孩。
个人财产策略只好使清洁的人或物。,无异物。缺少可见灰的金属(剪子等),灰会原因黑斑或高背景幕布。。
基材液体在室温下可稳固24h。,表露于阳光或对立的事物强光会损坏任务液体。。为了最好的总算,液体产卵在琥珀瓶中,忍住强光。。短时期表露于试验室光将不会损坏任务液体。。
朕做准备用于蛋白质转变的各式各样的膜。、封液、一抗、酶奖章的两种抗性、缓冲溶液、洗濯剂。对朕的乘积或订购数据感兴趣。,您可以作客朕的网页。
顺序综述:
睬:反日对称体浓度的优选法,运用推荐信的对称体变稀薄比,正片总算可以是C。,提议的对称体求出比值可以附加。 Materials 绝对必然的的零件。
将1mg/ml的东西抗力变稀薄到μg/ml。 或许 1:1000-1:5000变稀薄;
将1mg/ml的两种抗力变稀薄至10-50ng/ml或1:20,000-1:100,000变稀薄;
将两种根底身分(即显影剂的A液与B液)如1:1的求出比值配成液体;
睬:表露于阳光或对立的事物强光的任务液品尝受到损坏。,所以,液体应产卵在琥珀瓶中,忍住聚丙烯纤维。,试验室规范灯短期产卵将不会损坏任务。
将印迹膜停车超打旗语中 West 媒体液体培育5分钟;
不必然的的试剂片,用彻底的薄膜塑料互搭标志膜;
X光下公开
对立的事物必然的的决定性的:
完整东方 印迹膜:蛋白质负电泳隔开办法的详细地检查,并将蛋白质转变到硝化纤维素滤器上。。也可勤勉对立的事物典型的膜。;不管怎样,最优膜头等。
变稀薄缓冲溶液:运用TBS(第28376号乘积)或PBS(第28374号乘积)。21选一,变稀薄SuperSignal Western 印迹补充

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